【研究背景】

既存の抗体医薬品の問題点

• 哺乳細胞を用いて生産するため、生産コストが高い
• 複雑な糖鎖構造を有し、品質管理に多大なコストを要する
• 標的が細胞外に限定され、標的が枯渇しつつある
• 組織浸潤性が低い

一本鎖抗体 (scFv) の特徴

　メリット

• 大腸菌を使用して低コストで生産が可能である
• 細工が容易である
• 低分子であり、組織浸潤性が高い
• 血中半減期が短く、血中濃度のコントロールが容易である

　デメリット

• エフェクター機能を持たない
• 血中半減期が短いVH-VL間の相互作用を介した凝集性を有する

【研究目的】

scFvの開閉状態ダイナミクスを抑制することで、凝集性を改善するための汎用的手法の開発

【研究概要】

インテイン反応を利用した大腸菌体内における環状 scFv の調製

• 自発的に反応が進行するため、特別な試薬や手間が不要
• 大腸菌体内で合成と環状化を同時に行うことで、タンパク質調製の工程を大幅に短縮できる
• 一本鎖抗体 (scFv) を環状化することで閉じた状態を維持
  　(会合体の形成 (凝集性) の抑制、保存安定性の向上、凍結乾燥に伴う活性低下を著しく抑制)
• 環状化技術は汎用性が高く、一般に一本鎖抗体に適応可能
• 環状化したscFvは抗原親和性および熱安定性を損なわない
• リンカー内に遊離チオールを持ち、部位特異的化学修飾が可能